@mastersthesis {26452,
	title = {Bioprospec{\c c}{\~a}o de leveduras oleaginosas capazes de utilizar o glicerol bruto como fonte de carbono},
	year = {2015},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {Os biocombust{\'\i}veis, bioetanol e biodiesel, est{\~a}o entre as fontes de energia alternativas promissoras para reduzir a utiliza{\c c}{\~a}o dos combust{\'\i}veis f{\'o}sseis. O biodiesel {\'e} um {\'e}ster met{\'\i}lico ou et{\'\i}lico obtido a partir da transesterifica{\c c}{\~a}o de {\'o}leos vegetais na presen{\c c}a de um {\'a}lcool. Esta rea{\c c}{\~a}o gera como subproduto, o glicerol bruto (GB), que equivale a 10\% de todo volume gerado. Uma alternativa para o consumo do GB {\'e} a sua utiliza{\c c}{\~a}o como fonte de carbono por micro-organismos oleaginosos. Os {\'o}leos estocados podem ser utilizados como uma fonte alternativa de {\'o}leos para produ{\c c}{\~a}o do biodiesel. Os micro-organismos oleaginosos s{\~a}o capazes de acumular mais de 20\% de sua biomassa em lip{\'\i}deos e seus {\'o}leos apresentam estrutura qu{\'\i}mica semelhante aos {\'o}leos vegetais. Portanto, o objetivo deste trabalho foi selecionar leveduras capazes de metabolizar o glicerol bruto e estoc{\'a}-lo na forma de lip{\'\i}deos. Sessenta e tr{\^e}s isolados de leveduras oriundas da produ{\c c}{\~a}o de cacha{\c c}a foram avaliados quanto {\`a} capacidade de crescer na presen{\c c}a de GB, como {\'u}nica fonte de carbono, e armazen{\'a}-lo na forma de lip{\'\i}deos. As leveduras foram inoculadas em meio m{\'\i}nimo Synthetic Defined (SD) contendo 10\% de GB e incubadas a 23{\textdegree}C, durante um per{\'\i}odo de 48 horas. No ensaio colorim{\'e}trico com Sudan Black (corante lipof{\'\i}lico) as culturas foram fixadas em l{\^a}minas e analisadas em microsc{\'o}pio {\'o}ptico. Vinte e cinco cepas foram selecionadas como leveduras capazes de armazenar lip{\'\i}deos. Posteriormente, estas cepas foram submetidas a ensaio quantitativo utilizando o corante fluorescente Nile Red. Para isso, foram inoculadas em meio SD com 10\% de GB, incubadas a 28{\textdegree}C, sob agita{\c c}{\~a}o de 180 RPM, por 48 horas e colocadas em solu{\c c}{\~a}o Nile Red 0,1 mg/mL por 10 minutos. Seis leveduras apresentaram o dobro da acumula{\c c}{\~a}o de lip{\'\i}deo em compara{\c c}{\~a}o a Yarrowia lipolytica (controle positivo). Estas cepas foram posteriormente submetidas {\`a} caracteriza{\c c}{\~a}o dos {\'a}cidos graxos produzidos, na cromatografia gasosa-Flame Ionization Detector (CG-FID). A cepa LBCM3 apresentou o maior conte{\'u}do lip{\'\i}dico dentre as selecionadas com 36,60\% de lip{\'\i}deos. Al{\'e}m disso, esta foi a {\'u}nica cepa capaz de produzir simultaneamente os {\'a}cidos linol{\'e}ico e linol{\^e}nico, lip{\'\i}deos estes importantes para produ{\c c}{\~a}o de biodiesel. A cepa LBCM17 apresentou o segundo maior conte{\'u}do lip{\'\i}dico com 27,90\% de lip{\'\i}deos totais. As cepas LBCM95 e LBCM98 exibiram 21,90\% e 2,17\% de lip{\'\i}deos totais, respectivamente. A LBCM1 apresentou o menor conte{\'u}do lipid{\'\i}co com 0,22\% de lip{\'\i}deos totais. Os resultados demonstram que as leveduras selecionadas s{\~a}o capazes de utilizar o GB como fonte de carbono e possuem potencial para aplica{\c c}{\~a}o na produ{\c c}{\~a}o de biodiesel. As seis leveduras selecionadas na an{\'a}lise semi-quantitativa, segundo resultado do sequenciamento da regi{\~a}o ITS5.8s, s{\~a}o Saccharomyces cerevisiae.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/4736},
	author = {Filipe da Silva Siqueira}
}
