@mastersthesis {26461,
	title = {Obten{\c c}{\~a}o e sele{\c c}{\~a}o de segregantes atrav{\'e}s da t{\'e}cnica BSA- Bulk segregants anlysis com maior ativa{\c c}{\~a}o da H+ ATPase de membrane citoplasm{\'a}tica {\`a} partir da linhagem Saccharomyces cereviseae PJ69-4a},
	year = {2016},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {A H+-ATPase de membrana citoplasm{\'a}tica de Saccharomyces cerevisiae mantem o gradiente eletroqu{\'\i}mico necess{\'a}rio para o transporte de {\'\i}ons, de nutrientes essenciais e pelo controle do pH interno. A ativa{\c c}{\~a}o da H+-ATPase da membrana citoplasm{\'a}tica em S. cerevisiae induzida pela glicose {\'e} dependente de c{\'a}lcio e o metabolismo do fosfatidilinositol parece estar envolvida neste processo de ativa{\c c}{\~a}o da enzima. A prote{\'\i}na Arg82 p {\'e} uma inositol quinase que tem como uma das suas fun{\c c}{\~o}es fosforilar o inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) em inositol 1,3,4,5-tetrafosfato (IP4) e inositol 1,3,4,5,6-pentafosfato (IP5) considerados importantes mensageiros na regula{\c c}{\~a}o da homeostase de Ca2+ citos{\'o}lico. O mutante arg82 da linhagem de S. cerevisiae PJ69 apresenta uma atividade da H+-ATPase superior a linhagem selvagem, indicando uma rela{\c c}{\~a}o da aus{\^e}ncia dessa prote{\'\i}na com o aumento nas concentra{\c c}{\~o}es de IP3 e de c{\'a}lcio citos{\'o}lico com subsequente ativa{\c c}{\~a}o da H+-ATPase. Curiosamente, esse efeito n{\~a}o {\'e} observado com o mesmo mutante obtido para a linhagem BY4742. Para estudar essa aparente contradi{\c c}{\~a}o foram realizados cruzamentos o mutante arg82 do background PJ69 (apresentando maior ativa{\c c}{\~a}o da Pma1 p induzida por glicose) e a estirpe selvagem do background BY4742 (com menor ativa{\c c}{\~a}o da Pma1), com posterior sele{\c c}{\~a}o de segregantes que possuem os fen{\'o}tipos similares ao da linhagem parental superior (arg82 do background PJ69). Ap{\'o}s cruzamento dessas linhagens, 600 segregantes F1 foram testados quanto {\`a} suscetibilidade ao antibi{\'o}tico higromicina e ao cloreto de l{\'\i}tio. Aproximadamente 34 segregantes que apresentaram comportamento similar ao parental superior foram selecionados para an{\'a}lise da acidifica{\c c}{\~a}o induzida por glicose para confirma{\c c}{\~a}o da maior ativa{\c c}{\~a}o da H+-ATPase induzida por glicose. Dentre esses segregantes, vinte com fen{\'o}tipo superior podem ser utilizados para o mapeamento de QTLs relacionados {\`a} maior ativa{\c c}{\~a}o da H+-ATPase induzida por glicose na linhagem S. cerevisiae PJ694a.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/7063},
	author = {{\textendash} Patr{\'\i}cia	Gon{\c c}alves	 Prates Barbosa}
}
