@mastersthesis {26462,
	title = {Avalia{\c c}{\~a}o da atividade da H+ _ ATPase de membrana citoplasm{\'a}tica em cepas de Saccharomyces cerevisiae de dois backgrounds gen{\'e}ticos com muta{\c c}{\~o}es dos genes SNF3, PMC1 e/ou ARG82},
	year = {2017},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {A H+-ATPase de membrana plasm{\'a}tica, codificada pelo gene PMA1, {\'e} respons{\'a}vel pela forma{\c c}{\~a}o de um gradiente eletroqu{\'\i}mico de pr{\'o}tons que possibilita o controle do pH intracelular e a capta{\c c}{\~a}o de nutrientes pela c{\'e}lula. A Pma1p {\'e} ativada na presen{\c c}a de glicose e v{\'a}rias prote{\'\i}nas est{\~a}o envolvidas nesse processo, modulando de forma direta ou indireta, a atividade desta enzima. Estudos pr{\'e}vios, realizados em diferentes background de S. cerevisiae, correlacionaram v{\'a}rios genes envolvidos na atividade da Pma1p, mas ainda n{\~a}o foi elucidado o papel de cada um deles nesta via de ativa{\c c}{\~a}o, bem como a rela{\c c}{\~a}o deles em cada background estudado. No presente trabalho foi realizada a constru{\c c}{\~a}o de m{\'u}ltiplos mutantes para os genes PMC1, SNF3 e ARG82 em dois diferentes background de S. cerevisiae (BY4741 e PJ69) a fim de ampliar o conhecimento dos mecanismos envolvidos na via de sinaliza{\c c}{\~a}o da ativa{\c c}{\~a}o da H+-ATPase mediada por glicose. Para isso, foram realizados procedimentos de acidifica{\c c}{\~a}o celular do meio, determina{\c c}{\~a}o da disponibilidade de c{\'a}lcio intracelular e avalia{\c c}{\~a}o da sensibilidade ao antibi{\'o}tico higromicina B e ao alum{\'\i}nio. Os resultados do presente trabalho confirmaram a import{\^a}ncia dos genes ARG82, PMC1 e SNF3 na regula{\c c}{\~a}o da atividade da H+-ATPase de membrana citoplasm{\'a}tica, em S. cerevisiae. Foram verificadas varia{\c c}{\~o}es na disponibilidade de c{\'a}lcio citos{\'o}lico e na atividade de Pma1p entre os mutantes constru{\'\i}dos. Aparentemente, a prote{\'\i}na Arg82p, dentre as tr{\^e}s prote{\'\i}nas estudadas neste trabalho, possui um papel mais importante na ativa{\c c}{\~a}o da enzima Pma1p, seja na: (i) modula{\c c}{\~a}o do c{\'a}lcio intracelular, (ii) na acidifica{\c c}{\~a}o do meio, (iii) na sensibilidade {\`a} higromicina e ao alum{\'\i}nio, e (iv) na capacidade fermentativa das c{\'e}lulas. Contudo, apesar da import{\^a}ncia do c{\'a}lcio como regulador intracelular na atividade de Pma1p, n{\~a}o foi verificada uma rela{\c c}{\~a}o direta entre a concentra{\c c}{\~a}o de c{\'a}lcio citos{\'o}lico e a atividade de Pma1p sugerindo que outros fatores possam estar envolvidos. Ademais, os diferentes resultados encontrados, nos diferentes backgrounds, demonstraram que o efeito das muta{\c c}{\~o}es poderia ser dependente da linhagem analisada.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/9355},
	author = {Maria Ana Santana e Figueiredo Bessa}
}
