@mastersthesis {26466,
	title = {A prote{\'\i}na Lpx1 como elo entre a sinaliza{\c c}{\~a}o de c{\'a}lcio intracelular e a ativa{\c c}{\~a}o de H+-ATPase de membrana citoplasm{\'a}tica, induzidas por glicose, em Saccharomyces cerevisiae.},
	year = {2018},
	type = {Tese de doutorado},
	abstract = {Em leveduras, como em outros eucariotos, o c{\'a}lcio desempenha um papel essencial nas vias de sinaliza{\c c}{\~a}o celular. No entanto, at{\'e} agora, a influ{\^e}ncia do c{\'a}lcio na ativa{\c c}{\~a}o de H+-ATPase de membrana citoplasm{\'a}tica induzida por glicose, uma via essencial para a fisiologia de leveduras, n{\~a}o foi demonstrada apesar de muitas evid{\^e}ncias sugerirem que o c{\'a}lcio {\'e} um fator primordial envolvido na ativa{\c c}{\~a}o de H+-ATPase. H+-ATPase {\'e} uma prote{\'\i}na de membrana citoplasm{\'a}tica essencial para criar um gradiente de H+, utilizado para o transporte de nutrientes e homeostase do pH. A ativa{\c c}{\~a}o de H+-ATPase {\'e} regulada pela atividade de diferentes prote{\'\i}nas como proteases, quinases e canais i{\^o}nicos. Neste trabalho, foi demonstrada a rela{\c c}{\~a}o entre a atividade de Lpx1p, uma serino-protease essencial para a ativa{\c c}{\~a}o induzida por glicose de H+-ATPase de membrana citoplasm{\'a}tica, e o c{\'a}lcio. Mutantes lpx1Δ exibiram um sinal de c{\'a}lcio intracelular que n{\~a}o foi afetado enquanto a atividade de bombeamento de pr{\'o}tons foi reduzida, indicando sua essencialidade na ativa{\c c}{\~a}o de H+-ATPase. Al{\'e}m disso, o aumento da atividade de bombeamento de pr{\'o}tons foi observado quando Lpx1p foi expresso em c{\'e}lulas lpx1Δ por meio de um vetor de express{\~a}o induz{\'\i}vel. Em testes in vitro, a atividade proteol{\'\i}tica de Lpx1p aumentou na presen{\c c}a de c{\'a}lcio. Dos ensaios in vitro, estabelecidos neste trabalho, foi demonstrado que Lpx1p, Ptk2p e c{\'a}lcio s{\~a}o elementos-chave para a ativa{\c c}{\~a}o de H+- ATPase. Esses resultados fortalecem um modelo em que a ativa{\c c}{\~a}o p{\'o}s-traducional de H+-ATPase induzida pela glicose e a sinaliza{\c c}{\~a}o de c{\'a}lcio intracelular, est{\~a}o realmente conectadas. Lpx1p seria este elo, aparentemente, dependendo da presen{\c c}a de c{\'a}lcio para ser ativada e hidrolisar tubulinas acetiladas ligadas {\`a} H+-ATPase, permitindo a libera{\c c}{\~a}o da cauda C-terminal para fosforila{\c c}{\~a}o e ativa{\c c}{\~a}o.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/9970},
	author = {Diogo Dias Castanheira}
}
