@mastersthesis {26471,
	title = {An{\'a}lise comparativa da express{\~a}o g{\^e}nica nas cepas selvagem W303 e pkc1∆ de Saccharomyces cerevisiae durante o processo de desrepress{\~a}o metab{\'o}lica.},
	year = {2007},
	type = {Tese de doutorado},
	abstract = {A levedura Saccharomyces cerevisiae possui uma via MAP quinase de transdu{\c c}{\~a}o de sinais composta por Pkc1p, Bck1p, Mkk1p e Mkk2p, e Mpk1p. J{\'a} foi descrito que esta via est{\'a} envolvida no controle da integridade da parede celular, na resposta ao estresse osm{\'o}tico, no crescimento de pseudo-hifas e no controle do metabolismo de carbono. Neste trabalho investigamos a participa{\c c}{\~a}o de Pkc1p no controle da express{\~a}o de genes envolvidos no metabolismo de carbono. Para isto, fizemos uma analise da express{\~a}o g{\^e}nica global atrav{\'e}s de microarranjos de DNA comparando a resposta global sob condi{\c c}{\~o}es de repress{\~a}o e desrepress{\~a}o metab{\'o}lica no mutante a pkc1∆ e na cepa selvagem correspondente W303. Os resultados obtidos indicaram uma diferen{\c c}a significativa na express{\~a}o global dos genes nas duas cepas analisadas. Vinte e oito genes envolvidos no metabolismo de carbono foram selecionados para valida{\c c}{\~a}o por RT-PCR e os resultados confirmaram que sete genes foram mais expressos na cepa W303 quando comparada com a cepa e quatro genes foram mais expressos na cepa pkc1 ∆ quando comparada com a cepa selvagem. An{\'a}lises {\textquotedblleft}In silico{\textquotedblright} apontaram tr{\^e}s fatores de transcri{\c c}{\~a}o Sok2p, Crz1p and Gcr1p, que podem estar envolvidos no controle da express{\~a}o g{\^e}nica por Pkc1p. Experimentos utilizando plasm{\'\i}deos contendo o gene da β- galactosidase sob controle dos promotores dos genes CYC1, HXT1 e SUC2 mostraram que a express{\~a}o destes genes se apresentava diminu{\'\i}da na cepa pkc1∆ para o gene HXT1, aumentada para o gene CYC1 e igual para o gene SUC2 quando comparada com a cepa selvagem W303. A atividade de Invertase apresenta-se significativamente diminu{\'\i}da na cepa pkc1 ∆ quando comparada com a cepa selvagem W303. Nossos resultados confirmam a participa{\c c}{\~a}o da prote{\'\i}na Pkc1p na regula{\c c}{\~a}o da express{\~a}o g{\^e}nica durante o processo de desrepress{\~a}o metab{\'o}lica.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/3462},
	author = {Ant{\^o}nio Helv{\'e}cio Totola}
}
@mastersthesis {26472,
	title = {Caracteriza{\c c}{\~a}o molecular e bioqu{\'\i}mica de cepas de Saccharomyces cerevisiae utilizadas na caracteriza{\c c}{\~a}o molecular e bioqu{\'\i}mica.},
	year = {2007},
	type = {Tese de doutorado},
	abstract = {Com o objetivo de caracterizar molecularmente a cepa Saccharomyces cerevisiae LBCM 427, selecionada a partir de dornas de fermenta{\c c}{\~a}o de cacha{\c c}a, utilizaram-se v{\'a}rias metodologias de an{\'a}lise de polimorfismo de DNA para permitir a discrimina{\c c}{\~a}o entre esta e as cepas presentes no local de origem. Os resultados demonstraram que RAPD-PCR, mtDNA, e PCR utilizando primers complementares a regi{\~a}o do gene COXI n{\~a}o foram suficientes para uma boa diferencia{\c c}{\~a}o entre a cepa LBCM 427 e cepas isoladas na mesma dorna de fermenta{\c c}{\~a}o. Por outro lado, o uso da cariotipagem para diferencia{\c c}{\~a}o com base no perfil cromossomal permitiu uma n{\'\i}tida distin{\c c}{\~a}o entre o grupo de cepas analisadas. Estes resultados demonstram que o uso de cepas iniciadoras requer um acompanhamento com o uso combinado de m{\'e}todos bioqu{\'\i}micos e moleculares. A cepa parenteral LBCM 427, foi segregada e as t{\'e}trades analisadas quanto a estabilidade fisiol{\'o}gica e bioqu{\'\i}mica em passagens sucessivas. Avaliaram-se os seguintes par{\^a}metros flocula{\c c}{\~a}o, n{\~a}o produ{\c c}{\~a}o de H2S, resist{\^e}ncia a 5,5{\textasciiacute},5{\textasciiacute}{\textasciiacute}-trifluoro-DLleucina (TFL) e cerulenina, crescimento em diferentes condi{\c c}{\~o}es de press{\~a}o osm{\'o}tica e de temperatura. Os resultados demonstraram que nenhuma cepa segregante reuniu todas as caracter{\'\i}sticas da cepa parental. Diante disto, foi selecionada uma cepa segregante que atendia ao crit{\'e}rio de resist{\^e}ncia a TFL e cerulenina para analisar o comportamento em uma fermenta{\c c}{\~a}o em caldo de cana e poss{\'\i}veis muta{\c c}{\~o}es no gene LEU4 que transcreve para a - isopropilmalato sintase. Esta segregante n{\~a}o foi afetada na presen{\c c}a de altas concentra{\c c}{\~o}es de L-leucina (20 mM) e, apresentou muta{\c c}{\~o}es no gene LEU4 ainda n{\~a}o descritas pela literatura. A cepa LBCM 427 e segregante foram avaliadas quanto {\`a} produ{\c c}{\~a}o de cacha{\c c}a em escala piloto. Os par{\^a}metros analisados foram: o perfil qu{\'\i}mico da bebida produzida e a adapta{\c c}{\~a}o das cepas em condi{\c c}{\~o}es similares {\`a}s encontradas na fabrica{\c c}{\~a}o artesanal da cacha{\c c}a. Por cromatografia gasosa, quantificaram-se os compostos vol{\'a}teis sendo estes o acetalde{\'\i}do, acetato de etila, metanol, n-propanol, isobutanol, {\'a}lcool isoam{\'\i}lico, e furfural. Verificou-se que as cepas LBCM 427 e segregante produzem elevados teores de {\'a}lcool isoam{\'\i}lico e {\'a}lcool isobut{\'\i}lico quando comparadas a uma cepa Saccharomyces cerevisiae comercial utilizada como controle. Outra cepa utilizada como controle do processo, a cepa nativa LBCM 422, sens{\'\i}vel a ambos compostos, produziu quantidades semelhantes de {\'a}lcool isoam{\'\i}lico quando comparada {\`a}s cepas LBCM 427 e segregante, resistentes a TFL e cerulenina. Os resultados apresentados oferecem uma importante contribui{\c c}{\~a}o para o desenvolvimento de novas estrat{\'e}gias de sele{\c c}{\~a}o de cepas selvagem com caracter{\'\i}sticas espec{\'\i}ficas, levando a produ{\c c}{\~a}o da cacha{\c c}a com maior produ{\c c}{\~a}o de compostos flavorizantes.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2713},
	author = {Maristela de Ara{\'u}jo Vicente}
}
