@mastersthesis {26460,
	title = {Utiliza{\c c}{\~a}o de res{\'\i}duos da produ{\c c}{\~a}o de biodiesel como base de meio de cultura para leveduras de interesse comercial},
	year = {2011},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {Em uma economia movida pelo transporte, a din{\^a}mica dos combust{\'\i}veis l{\'\i}quidos faz parte de sua engenharia. A mudan{\c c}a do consumo de energia baseado em combust{\'\i}veis f{\'o}sseis para os de fontes renov{\'a}veis {\'e} um desafio e uma necessidade de ordem econ{\^o}mica e ambiental. Uma vez que o petr{\'o}leo {\'e} a principal fonte f{\'o}ssil utilizada e possui reservas de f{\'a}cil acesso limitadas, o consumo destas ir{\'a} eventualmente exaurir sua oferta. Uma alternativa que tem mostrado-se promissora nos {\'u}ltimos anos {\'e} o uso dos Biocombust{\'\i}veis. Dentre estes, o maior destaque {\'e} dado ao Bioetanol e Biodiesel. A partir do processo produtivo de Biodiesel industrialmente utilizado s{\~a}o obtidos {\'e}steres monoalqu{\'\i}licos de {\'a}cidos graxos (Biodiesel) e co-produtos dos quais o mais importante {\'e} o glicerol. Muitos microrganismos s{\~a}o capazes de utilizar o glicerol como {\'u}nica fonte de carbono, e um exemplo s{\~a}o as leveduras. O objetivo deste projeto foi desenvolver um processo, industrialmente vantajoso, para utilizar um co-produto de baixo custo da produ{\c c}{\~a}o de Biodiesel como base para meio de cultura para diferentes leveduras. Utilizou-se tr{\^e}s linhagens de interesse comercial, Saccharomyces cerevisiae LBCM 653C (produtora de cacha{\c c}a) e do fermento de panifica{\c c}{\~a}o FLEISHMANN, e S. boulardii, e uma linhagem laboratorial, S. cerevisiae BY4741. Cresceu-se essas linhagens em dilui{\c c}{\~o}es de res{\'\i}duo glic{\'e}rico bruto de Biodiesel fornecido pelo CETEC (Centro Tecnol{\'o}gico de Minas Gerais/Belo Horizonte-MG) e pela BIOMINAS (Biominas Ind{\'u}stria e Com{\'e}rcio de Biodiesel LTDA/Ita{\'u}na-MG). As dilui{\c c}{\~o}es foram acrescidas de diferentes fontes nitrogenadas (YP {\textendash} Extrato de levedura e Peptona, Sulfato de Am{\^o}nio e Ur{\'e}ia) e analisadas quanto ao crescimento celular. As prepara{\c c}{\~o}es nas quais obteve-se crescimento celular similar {\`a}quele obtido em meio laboratorial YPGlicerol foi com o acr{\'e}scimo de YP como fonte nitrogenada, e o crescimento celular em res{\'\i}duo dilu{\'\i}do com ou sem a adi{\c c}{\~a}o Sulfato de Am{\^o}nio e Ur{\'e}ia n{\~a}o foi apreci{\'a}vel quando comparado {\`a}quele obtido com YP. An{\'a}lise dos dados mostrou que o crescimento celular em cada prepara{\c c}{\~a}o de res{\'\i}duo de Biodiesel dilu{\'\i}do depende da linhagem utilizada. Sugere-se que a manuten{\c c}{\~a}o do pH em valores mais baixos estimule o crescimento celular em res{\'\i}duo de Biodiesel dilu{\'\i}do. Al{\'e}m disso, a estocagem parece promover modifica{\c c}{\~o}es no res{\'\i}duo que inibem o crescimento celular da linhagem S. boulardii sob as condi{\c c}{\~o}es ensaiadas. Devido ao fato de que as leveduras estudadas foram capazes de crescer em dilui{\c c}{\~o}es de res{\'\i}duo de Biodiesel, a utiliza{\c c}{\~a}o deste em processo biotecnol{\'o}gico com leveduras {\'e} vi{\'a}vel.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2604},
	author = {Cristiana de Souza Bastos}
}
@mastersthesis {26459,
	title = {Fermenta{\c c}{\~a}o consorciada leveduras/bact{\'e}rias l{\'a}cticas aplicada {\`a} produ{\c c}{\~a}o de cacha{\c c}a como possibilidade de melhoria do padr{\~a}o de qualidade},
	year = {2011},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {Cacha{\c c}a {\'e} a bebida destilada mais consumida no Brasil, e a terceira mais consumida no mundo. O Brasil exporta este produto para 45 pa{\'\i}ses, por{\'e}m estas vendas n{\~a}o atingem 1\% da produ{\c c}{\~a}o nacional. Para incrementar a exporta{\c c}{\~a}o {\'e} necess{\'a}rio que se atinja um novo patamar de qualidade. Tal qualidade pode ser alcan{\c c}ada pela utiliza{\c c}{\~a}o de Lactato de et{\'\i}la leveduras selecionadas, que permitem a obten{\c c}{\~a}o de estabilidade f{\'\i}sico-qu{\'\i}mica e sensorial, al{\'e}m de incremento do {\textquotedblleft}flavour{\textquotedblright} devido {\`a} maior produ{\c c}{\~a}o de compostos vol{\'a}teis, especialmente {\'a}lcoois superiores e {\'e}steres. Um importante {\'e}ster, o lactato de etila, {\'e} descrito como tendo car{\'a}ter frutado e habilidade de mascarar o sabor vegetal residual da cacha{\c c}a. Ele {\'e} formado pela esterifica{\c c}{\~a}o do etanol com {\'a}cido l{\'a}tico, produzido por bact{\'e}rias l{\'a}ticas (LABs), que por sua vez s{\~a}o consideradas contaminantes do processo. O objetivo deste trabalho {\'e} investigar se {\'e} poss{\'\i}vel a utiliza{\c c}{\~a}o de bact{\'e}rias l{\'a}ticas em fermenta{\c c}{\~a}o mista, para a produ{\c c}{\~a}o de cacha{\c c}a de alto padr{\~a}o de qualidade, devido ao incremento nos teores do {\'e}ster lactato de etila. Este trabalho utiliza uma cepa de levedura Saccharomyces cerevisiae selecionada, a LBCM606, em associa{\c c}{\~a}o a cada uma das quatro cepas bacterianas descritas entre os contaminantes mais comuns da fermenta{\c c}{\~a}o da cacha{\c c}a: Bacillus coagulans, Bacillus stearothermophilus, Lactobacillus plantarum e Lactobacillus fermentum, al{\'e}m da cepa isolada de Yakult{\textregistered} Lactobacillus casei Shirota, utilizada como controle industrial, e duas cepas isoladas de dorna, bLBCM680-2 e bLBCM680-3. As fermenta{\c c}{\~o}es mistas foram comparadas {\`a} fermenta{\c c}{\~a}o tradicional. Al{\'\i}quotas da fermenta{\c c}{\~a}o foram retiradas nos tempos de 0, 2, 4, 6, 8, 24 e 48h e analisadas quanto ao pH e consumo de sacarose, e nos tempos 0, 24 e 48h quanto {\`a} popula{\c c}{\~a}o de c{\'e}lulas. Tais an{\'a}lises n{\~a}o forneceram evid{\^e}ncias de que bact{\'e}rias at{\'e} a concentra{\c c}{\~a}o de 106 UFC/ml possam prejudicar o processo produtivo da cacha{\c c}a devido ao consumo de a{\c c}{\'u}cares e queda da viabilidade de leveduras provocada por acidifica{\c c}{\~a}o do meio. A dosagem de lactato de etila foi realizada por CG-MS nos tempos de 8, 24 e 48h de fermenta{\c c}{\~a}o, e revelam um desempenho superior das cepas isoladas de dorna e, principalmente, do controle industrial, L. casei. Estas tr{\^e}s cepas testadas sob a condi{\c c}{\~a}o de reciclo de c{\'e}lulas, mant{\'e}m a viabilidade de c{\'e}lulas bacterianas apenas ao longo dos tr{\^e}s primeiros ciclos, sendo que no d{\'e}cimo ciclo, a contagem de c{\'e}lulas vi{\'a}veis {\'e} menor que 0,5\% da contagem do primeiro ciclo. A cepa bLBCM680-2 por possuir uma produ{\c c}{\~a}o de lactato de etila mais est{\'a}vel ao longo dos ciclos, {\'e} a mais promissora para a utiliza{\c c}{\~a}o em dornas de produ{\c c}{\~a}o de cacha{\c c}a.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2598},
	author = {Bruna Trindade de Carvalho}
}
@mastersthesis {26468,
	title = {Estrat{\'e}gia para a identifica{\c c}{\~a}o de prote{\'\i}na(s) quinase(s) envolvida(s) na ativa{\c c}{\~a}o da H+- ATPase de membrana plasm{\'a}tica de Saccharomyces cerevisiae.},
	year = {2011},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {A H+-ATPase de membrana plasm{\'a}tica de Saccharomyces cerevisiae {\'e} uma bomba de pr{\'o}tons que possui um papel importante na fisiologia deste microrganismo, uma vez que ativada {\'e} capaz de criar um gradiente eletroqu{\'\i}mico que {\'e} essencial para a capta{\c c}{\~a}o de nutrientes. A presen{\c c}a de glicose desencadeia modifica{\c c}{\~o}es p{\'o}s-traducionais que aumentam a atividade da H+-ATPase. Trabalhos realizados em nosso laborat{\'o}rio demonstraram que a ativa{\c c}{\~a}o da enzima, induzida por glicose, est{\'a} de alguma maneira ligada ao metabolismo de c{\'a}lcio. No entanto, a identidade da(s) prote{\'\i}na quinase(s) que leva {\`a} ativa{\c c}{\~a}o da enzima ainda n{\~a}o foi identificada. Neste trabalho, n{\'o}s mostramos os resultados de uma triagem com as cepas de levedura que apresentam dele{\c c}{\~o}es {\'u}nicas em genes que codificam para prote{\'\i}nas quinases existentes em Saccharomyces cerevisiae. Para isso, foi avaliada a varia{\c c}{\~a}o do pH extracelular durante o crescimento celular, com adi{\c c}{\~a}o de glicose, de leveduras apresentando dele{\c c}{\~o}es {\'u}nicas em genes que codificam para prote{\'\i}nas quinases conhecidas. As c{\'e}lulas foram cultivadas em placas de 96 po{\c c}os em YPD 2\%, e cada cultura foi avaliada com o indicador {\'a}cido-base p{\'u}rpura de bromocresol. Nossos resultados demonstraram que das 95 amostras analisadas, 53 foram incapazes de promover a acidifica{\c c}{\~a}o durante o crescimento celular. Quando a ativa{\c c}{\~a}o induzida por glicose foi medida por meio da determina{\c c}{\~a}o da acidifica{\c c}{\~a}o extracelular, apenas 20 mutantes apresentaram uma clara redu{\c c}{\~a}o na taxa de acidifica{\c c}{\~a}o, quando comparados {\`a} linhagem selvagem. Para eliminar as quinases que poderiam estar indiretamente envolvidas na regula{\c c}{\~a}o da ATPase, a sinaliza{\c c}{\~a}o de c{\'a}lcio foi medida e 14 mutantes apresentaram n{\'\i}veis de c{\'a}lcio normais durante a sinaliza{\c c}{\~a}o induzida por glicose. Posteriormente, n{\'o}s determinamos as propriedades cin{\'e}ticas da enzima, em membranas plasm{\'a}ticas purificadas, de mutantes com dele{\c c}{\~a}o em genes que codificam para 7 das 14 prote{\'\i}nas selecionadas como potenciais candidatas ao mecanismo de fosforila{\c c}{\~a}o da H+-ATPase, incluindo a cepa selvagem correspondente. No entanto, essa abordagem n{\~a}o permitiu esclarecer completamente a(s) identidade(s) da(s) prote{\'\i}na(s) quinase(s) que leva(m) {\`a} ativa{\c c}{\~a}o da H+-ATPase de membrana plasm{\'a}tica de Saccharomyces cerevisiae.},
	url = {https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2689},
	author = {Renata Rebeca Pereira}
}
@mastersthesis {26467,
	title = {Evid{\^e}ncias para a presen{\c c}a de uma prote{\'\i}na receptora de IP3 em c{\'e}lulas de Saccharomyces cerevisiae},
	year = {2011},
	type = {Disserta{\c c}{\~a}o de mestrado},
	abstract = {O bombeamento de pr{\'o}tons {\'e} um processo executado pela H+-ATPase de membrana plasm{\'a}tica Pma1p e {\'e} importante em Saccharomyces cerevisiae pois permite a capta{\c c}{\~a}o de nutrientes atrav{\'e}s da cria{\c c}{\~a}o de gradiente eletroqu{\'\i}mico. Em presen{\c c}a de glicose esta enzima {\'e} ativada. Estudos preliminares mostram uma forte rela{\c c}{\~a}o entre a presen{\c c}a de IP3, a libera{\c c}{\~a}o de c{\'a}lcio vacuolar e ativa{\c c}{\~a}o de Pma1p. Para a elucida{\c c}{\~a}o da via de libera{\c c}{\~a}o de c{\'a}lcio faz-se necess{\'a}ria a identifica{\c c}{\~a}o de prote{\'\i}nas receptoras de IP3 e suas rela{\c c}{\~o}es que culminam neste processo. Com este objetivo nosso trabalho adotou duas estrat{\'e}gias independentes: a utiliza{\c c}{\~a}o de ensaio de afinidade seguida de tentativa de identifica{\c c}{\~a}o por espectrometria de massas; e utiliza{\c c}{\~a}o de bancos de dados e recursos de bioinform{\'a}tica cont{\'\i}gua a avalia{\c c}{\~o}es bioqu{\'\i}micas para uma identifica{\c c}{\~a}o indireta atrav{\'e}s das intera{\c c}{\~o}es descritas para Yvc1p, prote{\'\i}na respons{\'a}vel pela sa{\'\i}da de c{\'a}lcio. Na primeira estrat{\'e}gia, verificamos que os prov{\'a}veis receptores de IP3 apresentam peso molecular entre 66 e 97 kDa, por{\'e}m ainda n{\~a}o obtivemos a identifica{\c c}{\~a}o por espectrometria de massas; na segunda estrat{\'e}gia, por{\'e}m, chegamos a um grupo de seis prote{\'\i}nas (Yvc1p, Alg6p, Nmd2p, Mdm10p, Sse2p e Swc3p ) que est{\~a}o relacionadas a libera{\c c}{\~a}o do c{\'a}lcio vacuolar e que apresentam o peso molecular entre 66 e 97 kDa.},
	url = {	http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2594},
	author = {Eduardo Perovano Santana}
}
